產(chǎn)品概述

Thermo Scientific? NAb? 蛋白 A Plus 離心試劑盒便于對各種樣品類型中的抗體進(jìn)行快速、小規(guī)模親和純化。固定化蛋白樹脂的每個預(yù)裝微量離心柱可從 0.5-2 mL 血清或其他樣品中快速純化 ≥34 mg 人 IgG。每個試劑盒都包括可用于純化至少兩份抗體樣品的緩沖液和簡化方案。

Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖是一種適合抗體純化的通用、高性能親和樹脂。它包含以高密度共價固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的純化天然蛋白 A。在現(xiàn)有的許多各種形式固定化蛋白 A 親和樹脂中，本產(chǎn)品具備最廣泛靈活的色譜應(yīng)用特性，能夠?qū)Σ溉閯游镅鍢悠氛麄€ IgG進(jìn)行高產(chǎn)量、高純度的純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。

Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖的特點(diǎn)：

?天然蛋白 A – 固定化蛋白 A 適用于從人、兔、豬、犬或貓血清中進(jìn)行多克隆 IgG 純化
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法最常用的樹脂
? 惰性且穩(wěn)定 – 優(yōu)越的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 A，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 高容量 – Pierce 蛋白 A 瓊脂糖的這一 “Plus” 類型包含密集上樣量的固定化蛋白 A，提供大于 34 mg 人 IgG/mL 樹脂（約 16 至 17 mg 小鼠 IgG/mL 樹脂）的結(jié)合容量

蛋白 A 是由多種金黃色葡萄球菌菌株生成的一種細(xì)胞壁組分。蛋白為46.7kDa 的單鏈多肽，基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四個高親和力 (Ka= 10^8/mol) 結(jié)合位點(diǎn)，能夠與選定哺乳動物物種的 IgG 類抗體 Fc 區(qū)相互作用。IgG 結(jié)合功能在 pH 值 8.2 時最佳，但在中性和生理緩沖液（pH 值 7.0 至 7.6）也可高效結(jié)合。

蛋白 A 是一種源自細(xì)菌的蛋白，對抗體（尤其是 IgG 類抗體）的 Fc 部分具有高親和力和特異性。與其替代品（蛋白G）相比，蛋白A對兔、豬、狗和貓的 IgG亞類結(jié)合力最強(qiáng)。蛋白 A 對人 IgG 也具有較高的結(jié)合力，但對 IgG3 的結(jié)合力很弱。蛋白 A 與小鼠 IgG1 的結(jié)合作用較弱，因此不推薦用于大多數(shù)包含該抗體同種型的應(yīng)用。

Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備，該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項(xiàng)優(yōu)勢。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán)，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留固定化蛋白A的結(jié)合功能。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
?支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長期）
?平均粒徑：45 至 165微米
?排阻極限：10,000 至 4,000,000 道爾頓
? 最大體積流速：約 1 mL/分鐘（對于 1 cm 直徑柱）
? 最大線性速度